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小鼠胚胎成骨細(xì)胞

簡要描述:小鼠胚胎成骨細(xì)胞MC3T3-E1 種屬鑒定1) 來源:顱頂骨2) 形態(tài):成纖維細(xì)胞,貼壁生長3) 含量:>1x106 細(xì)胞數(shù)4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝5) 用途:僅供科研使用

  • 產(chǎn)品型號(hào):MC3T3-E1
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2024-09-02
  • 訪  問  量: 296

詳細(xì)介紹

應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

小鼠胚胎成骨細(xì)胞MC3T3-E1 種屬鑒定
   MC3T3-E1是一種小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞,源自C57BL/6品系的胚胎小鼠顱骨。這種細(xì)胞具有分化成為成骨細(xì)胞和骨細(xì)胞的能力,并能在體外形成鈣化的骨組織。MC3T3-E1細(xì)胞系有多個(gè)亞克隆株,是研究成骨細(xì)胞分化、骨細(xì)胞生物學(xué)、骨代謝和骨肉瘤等疾病的理想材料,尤其適合研究胞外基質(zhì)(ECM)信號(hào)通路的作用。細(xì)胞形態(tài)呈成纖維細(xì)胞樣,貼壁生長,培養(yǎng)條件為5%CO2和37℃,常用培養(yǎng)液配方為MEMα培養(yǎng)基含核苷和GlutaMAX添加劑,添加10%胎牛血清FBS。傳代周期約為3-4天,傳代比例通常為1:3,換液頻率為每2-3天一次。MC3T3-E1細(xì)胞在科研中廣泛應(yīng)用,用于骨質(zhì)疏松癥、骨肉瘤、牙齒發(fā)育和骨組織工程等領(lǐng)域的研究。細(xì)胞檢測結(jié)果顯示,MC3T3-E1不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等污染。

        小鼠胚胎成骨細(xì)胞MC3T3-E1  

l 細(xì)胞鑒定

種屬鑒定已通過

l 細(xì)胞來源

國家資源庫

l 細(xì)胞背景

從胚胎/胎兒 C57BL/6 小鼠的顱骨建立;文獻(xiàn)中描述的分化為成骨細(xì)胞并產(chǎn)生膠原蛋白。該細(xì)胞有多個(gè)亞克隆,可以作為體外研究成骨細(xì)胞分化的良好模型。

l 培養(yǎng)條件:

1) 準(zhǔn)備MEMα(推薦awcell-0003)培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

l 注意事項(xiàng):

 

對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10?S的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3)細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

l 運(yùn)輸形式:

低溫:(1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

常溫(2) T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

l 生物安全

1. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2. 建議在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時(shí)始終使用防護(hù)手套、衣服和戴上防護(hù)面罩。注意:凍存管浸沒在液氮中會(huì)泄漏,并會(huì)慢慢充滿液氮。解凍時(shí),液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險(xiǎn)力吹掉其蓋子,從而產(chǎn)生飛揚(yáng)的碎屑造成人員傷害。

 

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