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當(dāng)前位置:首頁  >  產(chǎn)品中心  >  細(xì)胞系/細(xì)胞株  >  鼠源細(xì)胞系  >  hum-308人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞THP-1

人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞THP-1

簡要描述:人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞THP-1 STR鑒定從 1978 年復(fù)發(fā)的急性單核細(xì)胞白血病 (AML) 的 1 歲男孩的外周血中建立。該細(xì)胞可以吞噬乳汁珠和激活的紅細(xì)胞,無表面和胞質(zhì)免疫球蛋白。可以用佛波醇 TPA誘導(dǎo)單核細(xì)胞分化。

  • 產(chǎn)品型號:hum-308
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2024-09-02
  • 訪  問  量: 248

詳細(xì)介紹

應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

  THP-1細(xì)胞是一種人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞系,以下是一些關(guān)鍵特點(diǎn)和應(yīng)用:

  1、形態(tài)和功能特征:具有類似人原代單核細(xì)胞的形態(tài)和功能特征,包括細(xì)胞分化標(biāo)記。它們可以被誘導(dǎo)分化成單核/巨噬細(xì)胞,因此常被用作研究炎癥和免疫方向的細(xì)胞模型。

  2、誘導(dǎo)分化:通過特定的化學(xué)誘導(dǎo)劑,如佛波酯(PMA),可以分化成巨噬細(xì)胞。進(jìn)一步的極化可以通過添加脂多糖(LPS)和IFN-γ(誘導(dǎo)M1型巨噬細(xì)胞)或IL-4、IL-13(誘導(dǎo)M2型巨噬細(xì)胞)來實(shí)現(xiàn)。M1型巨噬細(xì)胞參與炎癥反應(yīng),而M2型巨噬細(xì)胞則參與抑炎作用和組織修復(fù)。

  3、炎癥模型:來源的M1型巨噬細(xì)胞是一種典型的炎癥模型,而M2型巨噬細(xì)胞則模擬炎癥后期的組織修復(fù)和重建過程。此外,還可以通過氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)誘導(dǎo)形成泡沫細(xì)胞,用于模擬動脈粥樣硬化的慢性炎癥模型。

  4、基因編輯:是進(jìn)行基因編輯的理想模型,尤其是結(jié)合CRISPR/Cas9技術(shù),可以高效地進(jìn)行基因敲除或敲入,以研究特定基因在免疫和炎癥過程中的作用。

  5、培養(yǎng)特性:易于在實(shí)驗(yàn)室中培養(yǎng)和擴(kuò)增,具有穩(wěn)定的基因背景,且不存在個體差異性問題,這有利于實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重現(xiàn)性。它們對培養(yǎng)條件有一定的要求,如對血清品質(zhì)要求較高,喜歡偏酸環(huán)境,且具有密度依賴性。

人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞THP-1 STR鑒定

人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞THP-1    

【THP1; O-THP-1; Tohoku Hospital Pediatrics-1】

l 細(xì)胞鑒定

STR鑒定已通過

l 細(xì)胞來源

國家資源庫

l 細(xì)胞背景

從 1978 年復(fù)發(fā)的急性單核細(xì)胞白血病 (AML) 的 1 歲男孩的外周血中建立。該細(xì)胞可以吞噬乳汁珠和激活的紅細(xì)胞,無表面和胞質(zhì)免疫球蛋白??梢杂梅鸩ù?TPA誘導(dǎo)單核細(xì)胞分化。

注意:NRAS 突變在 PubMed= 9379676 中被錯誤地指示為p.Gly12Ser。

l 細(xì)胞特性

 

1) 來源:急性單核細(xì)胞白血病,單核細(xì)胞

2) 形態(tài):單核細(xì)胞,懸浮

3) 含量:>1x106 細(xì)胞數(shù)

4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途:僅供科研使用

l 培養(yǎng)條件

1) 準(zhǔn)備RPMI-1640(推薦awcell-0002)培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;0.05 mM β-qiu基乙醇(細(xì)胞培養(yǎng)級 推薦:awcell-8211);雙抗,1%。

2) 參考傳代比例:傳代時控制細(xì)胞密度在2-4 ×105cell / mL,并在細(xì)胞生長至8-10 ×105cell / mL時進(jìn)行傳代。

3) 參考換液頻率:傳代時換液。

4) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

5) 凍存液:*培養(yǎng)液95%,DMSO 5%(使用該凍存液后,按照我?guī)斓慕?jīng)驗(yàn)復(fù)蘇存活率約50%,復(fù)蘇后需要額外培養(yǎng)7-10天才能恢復(fù)生長)

l 注意事項(xiàng)

 

【注意事項(xiàng)】:

該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞,根據(jù)培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)以及客戶的反饋,傳代時使用【半換液法】對細(xì)胞狀態(tài)較為有利,因此我?guī)旖ㄗh您使用【半換液法】進(jìn)行傳代。

1. 您在收到我們提供的用15ml離心管發(fā)貨的細(xì)胞后,請不要通過離心的方式收集細(xì)胞,可以先準(zhǔn)備兩個新的T25培養(yǎng)瓶,然后將細(xì)胞混合均勻后移入兩個新的T25培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加培養(yǎng)基到10ml。放入到37℃培養(yǎng)箱中。

2. 您在收到的是用T25培養(yǎng)瓶發(fā)貨的細(xì)胞,請先通過離心的方式收集細(xì)胞,然后將細(xì)胞重懸加入12ml按照說明書要求配置的*培養(yǎng)基吹打均勻后移入兩個新的T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)即可。

3. thp-1懸浮細(xì)胞。該細(xì)胞在培養(yǎng)時更喜歡溫和處理,培養(yǎng)時盡量少對細(xì)胞進(jìn)行離心處理以此造成對細(xì)胞的傷害。換液時不要全培養(yǎng)基更換,建議您使用【半換液法】進(jìn)行傳代,添加細(xì)胞培養(yǎng)基以稀釋細(xì)胞至維持密度即可。

4. 細(xì)胞對血清質(zhì)量較為敏感,我?guī)旖ㄗh您使用進(jìn)口品牌優(yōu)質(zhì)血清進(jìn)行培養(yǎng)。FBS不要滅活,如果細(xì)胞生長緩慢請嘗試使用其他FBS或暫時將FBS濃度增加到20%

5.該細(xì)胞的培養(yǎng)液中需添加β-qiu基乙醇(細(xì)胞培養(yǎng)級別),若不添加,可能會對細(xì)胞狀態(tài)造成影響。

β-qiu基乙醇的穩(wěn)定性有限,不可將β-qiu基乙醇添加到*培養(yǎng)基中長期儲存,在每次傳代或液體添加時再添加β-巰基乙醇。

β-qiu基乙醇(2-qiu基乙醇)被添加到淋巴細(xì)胞或其他細(xì)胞培養(yǎng)物中,因?yàn)樵谂囵B(yǎng)基中使用的FBS中氨基酸半胱氨酸供不應(yīng)求,而胱氨酸則很多。有些細(xì)胞(例如T細(xì)胞)無法將半胱氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞質(zhì)中,必須將其轉(zhuǎn)化為半胱氨酸。β-qiu基乙醇將胱氨酸還原為可被細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)的形式,然后轉(zhuǎn)化為細(xì)胞生長所需的半胱氨酸。  β-qiu基乙醇還是一種還原劑,可以分解培養(yǎng)中細(xì)胞產(chǎn)生的許多有毒代謝產(chǎn)物,從而改善細(xì)胞周圍的環(huán)境。

6.該細(xì)胞對細(xì)胞密度較為敏感,培養(yǎng)、傳代時請注意保持細(xì)胞密度在合適的范圍(具體請參考細(xì)胞說明書)。

7..該細(xì)胞凍存后復(fù)蘇率較低,凍存時請酌情提高細(xì)胞量

8.通常情況下可以通過向正在生長的細(xì)胞中添加*培養(yǎng)基來維持細(xì)胞的生長,每7天可以將細(xì)胞離心并重懸于新配的培養(yǎng)基中,來完成細(xì)胞的全換液。

ATCC有關(guān)thp-1細(xì)胞保持細(xì)胞活力的說明

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(頻繁的細(xì)胞計(jì)數(shù)是監(jiān)測thp-1的最佳方法。這些細(xì)胞應(yīng)該每2至3天通過向燒瓶中簡單加入少量新鮮培養(yǎng)基(使它們具有條件培養(yǎng)基)來培養(yǎng)。您不需要每次都離心細(xì)胞并重新傳代。當(dāng)在我們的實(shí)驗(yàn)室中培養(yǎng)時,到第2天,細(xì)胞通常可以擴(kuò)增到具有更多培養(yǎng)基的更大的燒瓶中。當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到8×10 5個活細(xì)胞/ ml時需要進(jìn)行傳代。不允許細(xì)胞密度超過1×10(6)活細(xì)胞/ ml。)

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10?S的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3)細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

4)運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。

l 運(yùn)輸形式

低溫:(1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

常溫: (2) T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

l 生物安全

1. 所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2. 建議在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時始終使用防護(hù)手套、衣服和戴上防護(hù)面罩。注意:凍存管浸沒在液氮中會泄漏,并會慢慢充滿液氮。解凍時,液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險(xiǎn)力吹掉其蓋子,從而產(chǎn)生飛揚(yáng)的碎屑造成人員傷害。

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